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食品中毒素的檢測
目前發(fā)現(xiàn)能引起人中毒的酶菌代謝產(chǎn)物至少有150種以上,常見的產(chǎn)毒性真菌有曲霉菌屬、青霉菌屬、鐮刀菌屬等,其中常見且研究多的是黃曲酶霉素、赭曲霉素、等。Bi-ancardi用ELISA比免、疫親和液相色譜的度和準(zhǔn)確度要低,但免疫親和液相色譜耗時較長、操作復(fù)雜費(fèi)用較高,因此,ELISA適宜用來作為一種篩選方法。Thirumala-DeVi等通過制備抗赭曲霉素A的多克隆抗體,用間接競爭ELISA來檢測紅辣椒中赭曲霉毒素A,該方法不受樣品中赭曲霉毒素B和黃曲酶霉素B1(AFB1)等的影響,小檢測量0.1ng/mL。黃曲酶霉素是由真菌黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一組次生代謝物,其中AFB1毒性大,分布也廣已正式被定為人類的致癌物質(zhì)。1977年,美國Lawellin等報道反向直接競爭ELISA法(即將辣根過氧化物酶標(biāo)記A FB1)用于檢測玉米中AFB1。其后,有些作者相繼報道了直接 競爭ELISA法(即將辣根過氧化物酶標(biāo)記A FB1抗體)及間接競爭ELISA 法檢測食品中AFB1.國內(nèi)1987年由李秀芳等建立了反向直接競爭ELISA法檢測玉米中AFB1.劉濱磊等介紹了在合成AFB1溶菌酶蛋白LYS結(jié)合物基礎(chǔ)上,分別建立了直接競爭ELISA、間接競爭ELISA及BA-ELISA三種檢測AFB1的方法。陳蘭明等采用辣根過氧化物酶標(biāo)記高親和力的AFB1抗體,建立了直接競爭抑制ELISA快速篩選法。該法檢測AFB1的線性范圍0.25~5.0ng/mL,靈敏度12.5pg。由于ELISA檢測AFB1方法成功的建立,其他黃曲酶霉素族毒素AFM1、AFC1的ELISA檢測方法在國內(nèi)也相繼建立。陳靖等應(yīng)用進(jìn)口的酶聯(lián)法試劑盒,對十幾株金黃色葡萄球菌株進(jìn)行腸毒素的檢測,小檢測量可達(dá)0.4ng/mL,結(jié)果SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法的結(jié)果一致。整個測定過程及為4h,大大縮短了檢測時間。組胺是魚類食物中毒的主要原因,也是“奶酪綜合征”的病因。Aygun等用競爭性直接ELISA和反相液相色譜測定奶酪中的組胺,檢測限分別為2mg/kg,通過對50種奶酪產(chǎn)品進(jìn)行檢測,表明用ELISA檢測奶酪中的組胺是可行的。Gigirey,等用ELISA法分析新鮮的Albacone魚中的組胺 。
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