為了更好地進(jìn)行
氯霉素檢測,在使用前需要對其正確操作步驟及注意事項(xiàng)都有一定的了解,下面我們來仔細(xì)說說。
氯霉素檢測的正確操作步驟:
1、于適當(dāng)微孔中分別加入100mL標(biāo)準(zhǔn)溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前處理的樣品溶液。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶標(biāo)記物。
4、輕敲盤子四周,使其充分混合后于室溫下避光靜置溫育1小時(shí)。
5、將微孔中的反應(yīng)液甩掉,再將洗液加滿每一微孔后甩掉,重復(fù)洗3次。
6、一次甩掉后,在吸水紙上拍干。
7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后,輕敲盤子四周,使其充分混合。
8、于室溫下避光靜置溫育20分鐘。
9、于每一微孔中加入100mL反應(yīng)終止液。
10、用酶標(biāo)儀于波長450nm下判讀。
氯霉素檢測的注意事項(xiàng):
1、使用前先將氯霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液6瓶,濃縮萃取稀釋液,濃縮洗滌液,酶標(biāo)記物,底物溶液及微量測試孔條置于室溫下,回溫30分鐘。
2、原倍萃取稀釋液及洗滌液配制
用蒸餾水將10倍濃縮萃取稀釋液及濃縮洗滌液分別以1: 9的比例稀釋(即1mL濃縮液+9mL蒸餾水),即可作為樣品萃取稀釋液與微孔板清洗液。
3、回溫后,取出所需微量測試孔條,將剩余板條立即放回鋁箔袋中用膠帶封好,置于40℃保存。