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單克隆抗體捕獲ELISA法
這是在抗體捕獲試驗(yàn)基礎(chǔ)上,近幾年發(fā)展起來的一種檢測技術(shù),它可以避免同型抗體間對抗原位點(diǎn)的競爭而敏感性差的問題,也可避免如類風(fēng)濕因子(RF)等引起的非特異性反應(yīng),敏感性和特異性強(qiáng)。Florent等成功的將此種方法應(yīng)用于牛呼吸道病毒感染的IgM抗體檢測,Lee等應(yīng)用IBDV的單克隆抗體通過單克隆抗體捕獲ELISA法(Mac-ELISA)檢測出抗IBDV的特異性抗體,在醫(yī)學(xué)上成功應(yīng)用Mac-ELISA方法的報道較多。
Mac-ELISA的一個主要用途是檢測各種病毒感染早期特異性IgM抗體的消長水平,IgM是病毒等病原微生物在感染過程中產(chǎn)生zui早的一類抗體,但該抗體半衰期短,消失快,通過Mac-ELISA技術(shù)在待檢樣品中“捕獲"到特異性IgM,即可證實(shí)有某種病原的早期感染。Mac-ELISA是主要用于病毒感染早期診斷中的一種新方法。
Mac-ELISA檢測IgM抗體的原理是將IgM(u鏈)單克隆抗體(McAb)包被載體,McAb可以從血清成分中專一地捕獲IgM,再用相應(yīng)病毒(細(xì)菌)、酶標(biāo)記該病毒(細(xì)菌)抗體,或者該病毒(細(xì)菌)抗體和酶標(biāo)記抗體去檢測IgM抗體。