您好,歡迎來(lái)到上海研謹(jǐn)生物科技有限公司!
13585717991
021-65232515
兔臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒
兔臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒說(shuō)明書
(細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué))
【產(chǎn)品規(guī)格】
200ml/Kit
【產(chǎn)品組成】
為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
| 名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
A | 兔臟器組織白細(xì)胞分離液 |
| 200ml |
B | 樣本稀釋液(贈(zèng)品) | 2010C1119 | 200ml |
C | 清洗液(贈(zèng)品) | 2010X1118 | 200ml |
D | F液(贈(zèng)品) | F2013TBD | 200ml |
E | 紅細(xì)胞裂解液(贈(zèng)品) | NH4CL2009 | 100ml |
F | 說(shuō)明書 |
|
|
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
A.適用儀器
zui大離心力可達(dá) 1200g的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
B.耗材
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)地 |
15ml離心管散裝 | 339650 | 美國(guó) NUNC |
15ml離心管架裝 | 339651 | 美國(guó) NUNC |
50ml離心管散裝 | 339652 | 美國(guó) NUNC |
50ml離心管架裝 | 339653 | 美國(guó) NUNC |
無(wú)菌膠頭滴管或塑料滴管 |
|
|
【檢驗(yàn)方法】
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
1.首先制備組織單細(xì)胞懸液,制備方法詳見“組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)”。
2.取一支15ml離心管,加入與制備的組織單細(xì)胞懸液等量的分離液(注:分離液zui少不
得少于 5ml)。
3.用吸管小心吸取制備的組織單細(xì)胞懸液加于分離液液面上,400-500g,離心20-30min。
(注:根據(jù)組織單細(xì)胞懸液樣本量確定離心條件,組織單細(xì)胞懸液量越大,離心力越大,
離心時(shí)間越長(zhǎng),具體離心條件需客戶自行摸索,以達(dá)到分離效果)。
4.離心后用吸管小心吸取所有環(huán)狀乳白色細(xì)胞層(一層或兩層),加入10 ml清洗液(產(chǎn)
品編號(hào):2010X1118),混勻細(xì)胞。250g,離心 10min。重復(fù)洗滌 2-3次,即得所需白細(xì)
胞。
5.如有紅細(xì)胞殘留請(qǐng)使用紅細(xì)胞裂解液(產(chǎn)品編號(hào):NH4CL2009)裂解紅細(xì)胞,具體操
作方法詳見“紅細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明”。
【注意事項(xiàng)】
1.全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,zui
好在取樣 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),樣品存放時(shí)間越長(zhǎng),細(xì)胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后
分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。
2.本實(shí)驗(yàn)不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無(wú)靜電、低靜電離
心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面
會(huì)變成毛面,影響細(xì)胞分離效果。
3.分離液用量大于制備的組織單細(xì)胞懸液樣本時(shí),分離效果更佳。
4.如實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低,請(qǐng)上海研謹(jǐn)以尋求幫助、。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
18-25℃保存,有效期 2年。本品易感染細(xì)菌,需無(wú)菌條件操作。無(wú)菌條件下操作,啟
封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
【參考值(參考范圍)】
本實(shí)驗(yàn)白細(xì)胞提取率及純度大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】
1.組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)
2.所獲得白細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。
3.所獲得白細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。
4.所獲得白細(xì)胞的鑒定方法
A.流式細(xì)胞技術(shù)
B.免疫組化技術(shù)
C.原位雜交技術(shù)
D.PCR技術(shù)
注:上述技術(shù)方案詳情請(qǐng)登陸本搜索“細(xì)胞分離、
純化、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊(cè)”,并在說(shuō)明書項(xiàng)目欄下下載使用。
【可能存在的問題及解決方法】
1.由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示:
出現(xiàn)情況 | 出現(xiàn)原因 | 建議解決方案 |
離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層 | 轉(zhuǎn)速過小或離心時(shí)間過短 | 適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速 |
離心后目的細(xì)胞存在于分離液中 | 轉(zhuǎn)速過大或離心時(shí)間過長(zhǎng) | 適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速 |
離心后白環(huán)層彌散 | 細(xì)胞密度過大 | 調(diào)整細(xì)胞密度 |
離心后白環(huán)層太淺或看不見 | 細(xì)胞密度過小 | 調(diào)整細(xì)胞密度 |
2.本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地
區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí),恒定離
心時(shí)間,對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。
3.本分離液依照標(biāo)準(zhǔn),全部使用藥用級(jí)原料,性能指標(biāo)與國(guó)產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同,可
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注:在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí),離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g為基數(shù),直至達(dá)到分離效果,
離心力zui小不得小于 400g,zui大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min為準(zhǔn)。
其他部分產(chǎn)品:
WBC1077 | TBD | 人外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 2*100ml |
WBC1077-1 | TBD | 人外周血白細(xì)胞分離液試劑盒(FICOLL配置) | 2*100ml |
WBC1083 | TBD | 大鼠外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1083P | TBD | 大鼠臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1083Z | TBD | 大鼠腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1092 | TBD | 小鼠外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1092P | TBD | 小鼠臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1092Z | TBD | 小鼠腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC10965 | TBD | 兔外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC10965P | TBD | 兔臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC10965Z | TBD | 兔腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1079 | TBD | 狗外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1079P | TBD | 狗臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1079Z | TBD | 狗腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1086 | TBD | 牛外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1086P | TBD | 牛臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1086Z | TBD | 牛腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1085 | TBD | 豚鼠外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1085P | TBD | 豚鼠臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1085Z | TBD | 豚鼠腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1090C | TBD | 雞外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1090CP | TBD | 雞臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1078H | TBD | 猴外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1078HP | TBD | 猴臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1078HZ | TBD | 猴腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1110 | TBD | 豬外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1110P | TBD | 豬臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1110C | TBD | 豬腸黏膜組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1110Z | TBD | 豬腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1094 | TBD | 馬外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1094P | TBD | 馬臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1094Z | TBD | 馬腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1087 | TBD | 羊外周血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1087P | TBD | 羊臟器組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1087Z | TBD | 羊腫瘤浸潤(rùn)組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1080F | TBD | 魚全血白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |
WBC1080FZ | TBD | 魚組織白細(xì)胞分離液試劑盒 | 100ml |